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近年來(lái)，餐廚垃圾的產(chǎn)量急劇增加，據(jù)統(tǒng)計(jì)，中國(guó)每年產(chǎn)生的餐廚垃圾超過(guò)6000×104 t。在餐廚垃圾的處理過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生大量的餐廚廢水，而餐廚廢水的無(wú)害化和資源化處理受到廣泛關(guān)注。厭氧消化技術(shù)可以將餐廚廢水中的有機(jī)質(zhì)轉(zhuǎn)化為沼氣，實(shí)現(xiàn)能源的回收與利用。然而，厭氧消化產(chǎn)生的沼氣中含有40%~60%的不可燃?xì)怏wCO2，降低了沼氣的熱值。有研究表明，提純后的沼氣(CH4>90%)可用作車(chē)輛燃料或作為天然氣替代能源。目前，沼氣提純方法可以分為物理法、化學(xué)法和生物法等。沼氣生物提純作為一種新型處理技術(shù)越來(lái)越受到重視，該技術(shù)利用嗜氫產(chǎn)甲烷菌的新陳代謝作用將CO2和H2轉(zhuǎn)化為CH4，而不是將CO2從體系中分離或吸收，可減少CO2排放，故具有低能耗、無(wú)二次污染等特點(diǎn)。

根據(jù)供氫方式的不同，沼氣生物提純技術(shù)可分為原位提純和異位提純。原位沼氣提純中H2直接注入?yún)捬跸w系中，在微生物作用下H2和CO2轉(zhuǎn)化為CH4，裝置簡(jiǎn)單易操作，但氫分壓的增加及混合剪切力的增強(qiáng)可能會(huì)降低產(chǎn)甲烷菌的性能，導(dǎo)致有機(jī)酸積累，降低反應(yīng)效率。異位生物提純中厭氧消化和沼氣提純?cè)?個(gè)獨(dú)立體系內(nèi)進(jìn)行，厭氧消化產(chǎn)生的沼氣通入提純體系內(nèi)，嗜氫產(chǎn)甲烷菌在H2的作用下提純沼氣，具有較高穩(wěn)定性和靈活性。然而，H2的氣液傳質(zhì)效率成為沼氣提純的主要限制因素。如何提高H2的溶解度是解決低H2傳質(zhì)速率的關(guān)鍵。納米零價(jià)鐵(nanozero-valentiron，nZVI)在厭氧條件下可以與水反應(yīng)生成H2(式(1))，該過(guò)程中H2從容器底部析出，可以加大氣液接觸面積。DONG等的研究表明，nZVI溶解產(chǎn)生H2可以提高CO2的甲烷化。此外，氣體傳遞系數(shù)的提高可以提升H2氣-液傳質(zhì)速率(式(2))。有研究表明，氣體循環(huán)可有效增加氣體傳遞系數(shù)，提高H2利用率和CH4含量。KARIM等利用氣體循環(huán)提高了牛糞厭氧體系中CH4的產(chǎn)量。ZHAO等在氣體循環(huán)條件下對(duì)污泥進(jìn)行半連續(xù)厭氧消化處理，與無(wú)氣體循環(huán)相比，CH4含量提高了14%~15%。但關(guān)于nZVI供氫的異位生物提純與氣體循環(huán)相結(jié)合的研究報(bào)道還較少。

式中：Rt表示H2傳質(zhì)速率，mol·(L·h)-1；kLa表示線(xiàn)性氣體傳遞系數(shù)，h-1；H2gTh表示氣相中H2濃度，mol·L-1；H2l表示液相中H2濃度，mol·L-1。

本研究通過(guò)厭氧消化處理餐廚廢水，采用異位生物提純方法提高CH4含量。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，利用nZVI在厭氧體系下析氫為沼氣提純體系提供H2，同時(shí)設(shè)計(jì)單向式、往復(fù)式、循環(huán)式3種氣體循環(huán)方式，分析了不同氣體循環(huán)方式下沼氣異位生物提純效果，以期獲得最佳的運(yùn)行方式。

1、材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

厭氧消化的底物為餐廚廢水，取自無(wú)錫市某餐廚垃圾處理廠。厭氧顆粒污泥取自無(wú)錫市某食品廠的厭氧消化池。原始的餐廚廢水和接種污泥的性質(zhì)如表1所示。nZVI(直徑50nm，純度99.9%)購(gòu)自寧波金雷納米材料科技有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)裝置

本研究設(shè)置了單向式、往復(fù)式和循環(huán)式3種實(shí)驗(yàn)。每種方式均采用異位生物提純法，由厭氧消化體系(圖1，A1、A2、A3)和沼氣提純體系(圖1，U1、U2、U3)2個(gè)體系構(gòu)成。其中，前一體系用于餐廚廢水厭氧消化處理，產(chǎn)生沼氣；后一體系用于沼氣生物提純，nZVI提供H2。在前期研究基礎(chǔ)上，將收集的餐廚廢水經(jīng)離心去除固體物質(zhì)后稀釋10倍使用，厭氧消化體系中底物和接種物按COD底物:VS接種物(質(zhì)量比)為1.2∶1在500mL血清瓶?jī)?nèi)接種。將nZVI和厭氧顆粒污泥投加到沼氣生物提純體系中，根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道和前期實(shí)驗(yàn)，選擇nZVI的質(zhì)量濃度為6g·L-1，該體系不添加其他底物，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)參數(shù)如表2所示。實(shí)驗(yàn)前向所有反應(yīng)瓶?jī)?nèi)通5min氮?dú)庖跃S持厭氧環(huán)境，采用2mol·L-1 NaOH或HCl將厭氧-沼氣提純反應(yīng)瓶?jī)?nèi)初始pH調(diào)至7.00，在(36±1)℃下反應(yīng)，反應(yīng)過(guò)程中對(duì)厭氧消化體系采用間歇式攪拌，間隔時(shí)間為2h，攪拌轉(zhuǎn)速為60r·min-1。實(shí)驗(yàn)的前3d為厭氧消化產(chǎn)沼氣，從第4天開(kāi)始啟動(dòng)沼氣循環(huán)操作，每天循環(huán)2次，每次循環(huán)持續(xù)1h，具體操作方式如下文所述。

實(shí)驗(yàn)S1為單向式。在A1內(nèi)進(jìn)行餐廚廢水厭氧消化處理，產(chǎn)生的沼氣(含CO2)通入U(xiǎn)1體系，在U1內(nèi)利用nZVI供氫實(shí)現(xiàn)沼氣生物提純。

實(shí)驗(yàn)S2為往復(fù)式。在最初3d內(nèi)，打開(kāi)閥門(mén)1和2，關(guān)閉閥門(mén)3，在集氣袋1內(nèi)收集A2產(chǎn)生的沼氣(含CO2)以及U2中nZVI產(chǎn)生的H2。第4天啟動(dòng)氣體循環(huán)，做氣體循環(huán)處理時(shí)，關(guān)閉閥門(mén)1，打開(kāi)閥門(mén)2和3，以往復(fù)方式循環(huán)集氣袋1中收集的氣體。往復(fù)循環(huán)時(shí)先將U2反應(yīng)瓶?jī)?nèi)混合物搖勻，再將U2反應(yīng)瓶?jī)A斜，使閥門(mén)2連接的氣管進(jìn)入到U2反應(yīng)瓶液面以下(圖1-U2中虛線(xiàn)氣管)，集氣袋1內(nèi)氣體全部通入U(xiǎn)2，經(jīng)微生物利用后進(jìn)入集氣袋2。然后將閥門(mén)3連接的氣管進(jìn)入到U2反應(yīng)瓶液面以下(圖1-U2中虛線(xiàn)氣管)，集氣袋2內(nèi)氣體全部通入U(xiǎn)2，經(jīng)微生物利用后進(jìn)入氣袋1。重復(fù)上述操作持續(xù)1h，每天2次。不做氣體循環(huán)處理時(shí)，打開(kāi)閥門(mén)1和2，關(guān)閉閥門(mén)3，在集氣袋1內(nèi)收集A2和U2產(chǎn)生的氣體。

實(shí)驗(yàn)S3為循環(huán)式。在最初的3d內(nèi)，關(guān)閉閥門(mén)1和2，U3中nZVI產(chǎn)生的H2先進(jìn)入A3體系，經(jīng)微生物利用后與A3中產(chǎn)生的沼氣混合進(jìn)入集氣袋。第4天啟動(dòng)氣體循環(huán)，打開(kāi)閥門(mén)1和2，將集氣袋內(nèi)的氣體依次通入U(xiǎn)3、A3，形成U3-A3-集氣袋-U3閉環(huán)沼氣循環(huán)，重復(fù)上述操作持續(xù)1h，每天2次。

1.3 分析方法

TS、VS、MLSS、MLVSS、COD測(cè)定根據(jù)《國(guó)家水和廢水監(jiān)測(cè)分析方法》。pH采用pH計(jì)測(cè)定，ORP采用氧化還原電位儀測(cè)定，富氫值(HE)采用富氫電極測(cè)定，C、N、H采用元素分析儀測(cè)定。VFAs濃度采用氣相色譜儀(日本島津GC-2010PLUS)測(cè)定，以高純氮為載氣，檢測(cè)器采用氫火焰離子化檢測(cè)器(FID)，溫度設(shè)置為250℃；分析柱為peg-20m色譜柱，柱溫設(shè)置為70℃；進(jìn)樣口溫度為250℃。氣體(H2、CH4和CO2)采用氣相色譜儀(GC-2014，日本島津公司)測(cè)定，熱導(dǎo)檢測(cè)器(TCD)及TDX-1色譜柱，柱溫，進(jìn)樣口溫度和檢測(cè)器溫度分別為100、180和180℃，載氣為氬氣。根據(jù)GOEL等方法測(cè)定蛋白酶和脫氫酶的活性，按照DU等方法測(cè)定乙酸激酶活性，通過(guò)分光光度法測(cè)定輔酶F420活性。

1.4 微生物群落分析

各反應(yīng)體系結(jié)束后采集污泥樣品，使用PowerSoil試劑盒從樣品中提取DNA，再進(jìn)行聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增。細(xì)菌的引物為341F(5′-CCTACGGGGNGGCWGCAG-3′)和805R(5′-GACTAChVGGTATCTACC-3′)。古菌第1輪引物為340F(5′-CCCTayGGGYGCASCAG-3′)和1000R(5′-GGCCATGCACYWCYTCTC-3′)，第二輪引物為349F(5′-GYGCASCAGKCGMGAAW-3′)和806R(5′-GGACTACVSGGGTATCTAAT-3′)，測(cè)序平臺(tái)為IlluminaMiSeq。

2、結(jié)果與討論

2.1 不同氣體循環(huán)方式對(duì)氣體含量變化的影響

如圖2(a)所示，前3d沒(méi)有啟動(dòng)氣體循環(huán)，S1、S2、S3的CH4含量均呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)。啟動(dòng)循環(huán)后，與S1相比，S2和S3的CH4含量在4~10d內(nèi)迅速增加。S1、S2、S3的CH4含量在第10天分別達(dá)到76.46%、87.15%、92.63%，在提純過(guò)程中的最大CH4含量分別為81.69%、88.12%、93.87%。有研究表明，未經(jīng)提純的沼氣中CH4含量約為60%。本實(shí)驗(yàn)中經(jīng)異位生物提純后CH4含量顯著提高(P<0.05)，與單向式相比，往復(fù)式和循環(huán)式氣體循環(huán)后CH4含量分別提高了6.43%和12.18%。

由圖2(b)可以看出，由于nZVI腐蝕析氫和沼氣的產(chǎn)生，S1、S2和S3的H2含量在第3天達(dá)到最大值，即13.46%、16.70%、14.00%，且S1和S3中的H2含量顯著低于S2(P<0.05)。這主要是因?yàn)椋篠1和S3體系首先啟動(dòng)了異位生物提純，H2的產(chǎn)生與消耗同時(shí)進(jìn)行；而S2產(chǎn)生的H2在前3d內(nèi)直接進(jìn)入集氣袋內(nèi)不參與沼氣提純。在啟動(dòng)氣體循環(huán)后，H2被反復(fù)注入體系并被微生物利用，在反應(yīng)結(jié)束時(shí)幾乎檢測(cè)不到H2，CH4含量也隨著H2循環(huán)次數(shù)的增加而提高。此外，H2的再循環(huán)也為厭氧消化體系提供更多的底物，促進(jìn)了有機(jī)物的水解，生物提純體系中nZVI與水產(chǎn)生H2的同時(shí)還生成Fe2+，F(xiàn)e2+可以與S2-結(jié)合，減少氣體循環(huán)過(guò)程中H2S的累積，從而避免H2S對(duì)產(chǎn)甲烷菌的抑制。

圖2(c)為CO2含量的變化情況。與H2變化相似，不同的是啟動(dòng)氣體循環(huán)后，CO2的降解速率高于H2。這主要是由于CO2在水中有較高的溶解性。含有H2和CO2的氣體循環(huán)可增加H2和CO2的溶解，并提高厭氧消化體系內(nèi)氣-液-固相的接觸時(shí)間，這有利于CH4的產(chǎn)生。LATHA等的研究表明，由于CO2的酸化性，間歇式氣體循環(huán)可以促進(jìn)酸堿平衡。在本實(shí)驗(yàn)中，nZVI在水中的溶解會(huì)產(chǎn)生OH-，提高系統(tǒng)的pH，這對(duì)產(chǎn)甲烷微生物產(chǎn)生不利影響，但CO2再循環(huán)可以維持體系pH穩(wěn)定。

圖3為累積沼氣和CH4產(chǎn)量情況。結(jié)果表明，S1、S2、S3反應(yīng)14d后的累積沼氣(CH4)產(chǎn)量分別為70.57(57.65)、96.60(85.12)、167.44(157.18)mL·g-1。與S1和S2相比，S3體系內(nèi)沼氣和甲烷產(chǎn)量均顯著提高(P<0.05)。這與ZHAO等的研究結(jié)果一致。

據(jù)報(bào)道，氣體循環(huán)可以提高厭氧消化體系內(nèi)產(chǎn)甲烷菌對(duì)底物的利用率。由于S3中的氣體在厭氧消化和沼氣提純2個(gè)體系中進(jìn)行循環(huán)，兩體系的微生物可以將H2和CO2轉(zhuǎn)化為CH4，從而提高S3中的甲烷產(chǎn)量。而S1未進(jìn)行氣體循環(huán)，S2的氣體僅在沼氣提純體系中進(jìn)行循環(huán)，因此，相對(duì)于S3，S1、S2的H2和CO2利用率更低。

2.2 COD和VFAs的變化情況

沼氣/CH4產(chǎn)量與厭氧反應(yīng)體系中COD和VFAs的降解相關(guān)。如圖4(a)所示，A1、A2和A3的COD值分別從第4天的2856、1776、2032mg·L-1下降到第14天的140、125、115mg·L-1，A2和A3的COD降解速率高于A1。這一結(jié)果表明，氣體循環(huán)有利于促進(jìn)餐廚廢水中有機(jī)物的降解。WEI等認(rèn)為，外源H2不僅可以將CO2轉(zhuǎn)化為CH4，還可以促進(jìn)有機(jī)物降解。氣體循環(huán)可以提高有機(jī)物的產(chǎn)CH4率，這也是S2和S3體系中CH4產(chǎn)量增加的原因之一。

由圖4(b)可以看出，A1、A2、A3的最大VFAs質(zhì)量濃度(第2天)分別為3.78、3.70、3.99g·L-1，此后VFAs逐漸下降直到反應(yīng)結(jié)束。3個(gè)厭氧消化體系均未出現(xiàn)酸化現(xiàn)象，但VFAs的降解率是否與有氣體循環(huán)有關(guān)。在第4天開(kāi)始對(duì)S2和S3啟動(dòng)氣體循環(huán)后，A2和A3中VFAs的降解速率明顯高于A1(P<0.05)。A2和A3系統(tǒng)中的VFAs分別在第6天和第7天完全降解，而A1系統(tǒng)VFAs降解至0的時(shí)間(第10天)相對(duì)滯后。由此可知，氣體循環(huán)可提高厭氧微生物的降解性能。

2.3 pH、ORP、HE的變化情況

由圖5(a)可看出，A1、A2、A3中的pH在厭氧消化開(kāi)始時(shí)由7.00迅速下降到6.75、6.79、6.76，然后上升直至反應(yīng)結(jié)束。這是由于厭氧消化過(guò)程中快速水解和酸化導(dǎo)致VFAs積累，隨著VFAs的消耗，pH逐漸升高。整個(gè)過(guò)程中A1、A2、A3的最高pH分別為7.46、7.39、7.35。與A1相比，由于氣體循環(huán)，A2和A3在穩(wěn)定階段更容易維持中性pH。這種現(xiàn)象在沼氣提純體系中較明顯。在U2和U3中由于nZVI溶于水產(chǎn)生OH-，pH在前3d逐漸升高(圖5(b))，這對(duì)產(chǎn)甲烷菌活性和nZVI釋氫均有不利影響。啟動(dòng)氣體循環(huán)后，pH逐漸恢復(fù)到產(chǎn)甲烷菌的最適范圍(6.5~7.5)。LI等認(rèn)為，通過(guò)氣體循環(huán)將CO2多次溶解到沼氣提純液相中，可中和nZVI產(chǎn)生的OH-以維持體系pH穩(wěn)定，為產(chǎn)甲烷菌提供最佳環(huán)境。在U1體系中，從第1天開(kāi)始，pH沒(méi)有顯著提高(P>0.05)。這是由于沼氣異位生物提純過(guò)程中來(lái)自A1的CO2不斷進(jìn)入U(xiǎn)1，因而中和U1中nZVI產(chǎn)生的OH-。

ORP可以反映厭氧消化過(guò)程中細(xì)胞代謝活動(dòng)的氧化還原平衡和電子轉(zhuǎn)移。nZVI作為一種還原劑，可以保持厭氧系統(tǒng)中較低的ORP。產(chǎn)甲烷菌中的多種酶能適應(yīng)較低的ORP環(huán)境，防止酶被氧化而失去活性。由圖5(c)和(d)可以看出，含有nZVI的沼氣提純體系ORP顯著低于厭氧消化體系(P<0.05)。XU等的研究表明，體系ORP的降低是nZVI提高CH4產(chǎn)量的重要因素。此外，U2和U3系統(tǒng)的ORP低于U1，這可能也是S2和S3沼氣產(chǎn)量增加的原因之一。

富氫值(HE)表示液相中的氫含量(圖5(e，f))。與厭氧消化體系相比，沼氣提純體系內(nèi)HE由0.15~2.18mg·L-1(A1、A2、A3)增加到0.89~5.58mg·L-1 (U1、U2、U3)。這表明厭氧條件下nZVI的析氫將大幅度增加液相內(nèi)的H2含量，HE的增加可以提高H2的傳質(zhì)效率，促進(jìn)厭氧微生物將更多的H2和CO2轉(zhuǎn)化為CH4。此外，氣體循環(huán)促進(jìn)了更多H2和CO2在液相中的溶解，因而加速了微生物對(duì)H2和CO2的利用。

2.4 酶活的變化情況

表3為反應(yīng)結(jié)束后各體系酶活情況。A1、A2、A3中，堿性蛋白酶活性分別為17.67、62.66、67.48nmol·(min·g)-1(以VS計(jì))，乙酸激酶活性分別為74.91、79.07、91.55nmol·(min·g)-1，較初始污泥均有所提高。A1、A2、A3、U1、U2、U3中，脫氫酶的活性分別為10.40、15.16、29.29、30.34、31.23、31.10μg·(min·g)-1，較初始污泥顯著提高(P<0.05)，且沼氣提純體系比厭氧發(fā)酵體系高。這是因?yàn)閚ZVI可以提供較低的ORP條件(圖5(d))，脫氫酶在該條件下能保持較高活性，有利于微生物高效利用H2和CO2，從而提高甲烷產(chǎn)率。輔酶F420是一種產(chǎn)甲烷菌酶，主要參與CH4的生成過(guò)程。U1、U2、U3中輔酶F420活性較原始污泥分別提高了84.85%、124.24%，127.73%，說(shuō)明氣體循環(huán)提高了輔酶F420的活性，尤其是生物提純體系。nZVI溶解產(chǎn)生的Fe2+也可以提高沼氣提純體系內(nèi)相關(guān)酶的活性，這對(duì)提高有機(jī)物的產(chǎn)CH4率具有促進(jìn)作用。

2.5 微生物群落變化分析

圖6(a)為反應(yīng)結(jié)束后各體系中細(xì)菌群落在門(mén)水平上的變化。初始污泥中豐度最大的是Chloroflexi(14.36%)，其次是Actinobacteria(8.53%)。經(jīng)過(guò)厭氧消化和沼氣提純后，微生物結(jié)構(gòu)發(fā)生了較大變化。樣品中的優(yōu)勢(shì)菌主要由Chloroflexi、Firmicutes、Proteobacteria、Bacteroidetes、Actinobacteria組成。在厭氧消化體系內(nèi)(A1、A2、A3)，Chloroflexi較初始污泥增加了5%~10%，Chloroflexi是厭氧消化的常見(jiàn)菌群，對(duì)餐廚廢水中的多糖和單糖均具有降解能力，并能夠產(chǎn)生乙酸為產(chǎn)甲烷菌提供底物。LI等的研究表明，Chloroflexi參與水解發(fā)酵過(guò)程，有利于促進(jìn)厭氧消化的進(jìn)程。Firmicutes提高了10.5%~14.4%，F(xiàn)irmicutes可以分泌多種胞外酶降解大分子底物，如蛋白質(zhì)和脂類(lèi)。因此，F(xiàn)irmicutes相對(duì)豐度的提高加速了難降解有機(jī)物的降解，為產(chǎn)甲烷菌提供營(yíng)養(yǎng)。Proteobacteria增加了2%左右，Proteobacteria的類(lèi)型比較復(fù)雜，其含有的多種類(lèi)型細(xì)菌不僅能利用葡萄糖、丙酸和丁酸等小分子化合物，而且會(huì)在酸化過(guò)程中產(chǎn)生乙酸為產(chǎn)甲烷菌提供底物。Bacteroidetes和Actinobacteria的相對(duì)豐度增加，Bacteroidetes和Actinobacteria是厭氧消化過(guò)程主要的產(chǎn)酸菌，對(duì)復(fù)雜的碳水化合物具有降解作用，其相對(duì)豐度的增加也會(huì)導(dǎo)致VFAs濃度的提高。這與圖4(b)的結(jié)果一致。沼氣提純體系內(nèi)(U1、U2、U3)由于沒(méi)有餐廚廢水作為底物，參與水解發(fā)酵過(guò)程的微生物沒(méi)有顯著變化，但與U1相比，U2和U3的5種優(yōu)勢(shì)菌相對(duì)豐度均有所增加。這說(shuō)明氣體循環(huán)可以提供H2和CO2，改善微生物群落結(jié)構(gòu)。

圖6(b)為反應(yīng)結(jié)束后各體系污泥中古菌群落在屬水平上的變化。優(yōu)勢(shì)菌是Methanothrix、Methanobacterium、Methanolinea、Methanomethylovorans。其中，Methanothrix屬于乙酸型產(chǎn)甲烷菌，Methanobacterium和Methanolinea屬于氫營(yíng)養(yǎng)型產(chǎn)甲烷菌，Methanomethylovorans屬于甲基型產(chǎn)甲烷菌。與原始接種污泥相比，Methanothrix在厭氧消化體系內(nèi)變化不大，但在沼氣提純體系降低了2%~6%，Methanomethylovorans在兩體系內(nèi)均有不同程度降低。然而，與初始污泥相比，Methanobacterium和Methanolinea由初始污泥的28%提高到38%~51%。此外，與厭氧消化體系(A1、A2、A3)相比，沼氣提純體系內(nèi)(U1、U2、U3) Methanobacterium和Methanolinea的相對(duì)豐度較大。這表明nZVI供氫的沼氣生物提純能促進(jìn)微生物向氫營(yíng)養(yǎng)型產(chǎn)甲烷菌演替。LI等認(rèn)為，Methanobacterium可以利用H2和CO2轉(zhuǎn)化為CH4。而與U1相比，U2和U3中2種氫營(yíng)養(yǎng)型產(chǎn)甲烷菌的相對(duì)豐度值最高。這表明氣體循環(huán)可以促進(jìn)氫營(yíng)養(yǎng)型產(chǎn)甲烷菌的富集，從而加快H2和CO2向CH4的轉(zhuǎn)化。

3、結(jié)論

1)對(duì)餐廚廢水厭氧消化產(chǎn)生的沼氣進(jìn)行基于nZVI供氫的異位生物提純，能有效提高CH4含量和產(chǎn)量。

2)單向式、往復(fù)式、循環(huán)式3種氣體循環(huán)方式的最終CH4含量分別為81.69%、88.12%、93.87%，CH4產(chǎn)量分別為57.65、85.12、157.18mL·g-1，其中循環(huán)式為最佳方式。

3)nZVI可降低沼氣提純體系內(nèi)ORP；nZVI供氫與氣體循環(huán)相結(jié)合，可以提高H2的氣-液傳質(zhì)效率；CO2再循環(huán)有利于維持體系酸堿平衡，優(yōu)化厭氧消化環(huán)境，在異位提純基礎(chǔ)上提高CH4含量和產(chǎn)量。

4)nZVI供氫的異位生物提純和氣體循環(huán)提高了脫氫酶和輔酶F420的相對(duì)活性，促進(jìn)了微生物向氫營(yíng)養(yǎng)型產(chǎn)甲烷菌的演替。其中，Methanobacterium和Methanolinea由初始污泥的28%提高到38%~51%。